博腾生物提供定制化的编辑方案,可应用于多种细胞场景,支持RNP、慢病毒、质粒等多样化递送方式,以及多维度检测方法,为您提供高效、稳定的细胞株构建与检测服务。
服务内容:
基因敲除/敲入稳转株构建,基因激活/沉默稳转株构建和点突变稳转株构建。
实验流程 | 服务内容 | |
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1.基因编辑方案设计 |
从多维度考量,提供定制化编辑方案 靶位点选择:CDS或非编码区; Cas表达形式:质粒、mRNA、蛋白; 报告基因:GFP、mCherry、Luc等 |
设计sgRNA、donor DNA和相关载体 sgRNA:基于靶位点筛选高效sgRNA; donor DNA:综合考虑编辑位点、目的、片段长度和形式(ssDNA/dsDNA/质粒)等因素,选择高效donor DNA |
2.细胞培养与转染 |
应用于多种细胞场景 T细胞、NK细胞、iPSCs等; |
多样化高效递送 Viral-based (LV、AAV)、合成材料(LNPs、GNPs)、物理方法(电穿孔) |
3.转染后细胞的鉴定与检测 |
多维度检测编辑效率 核酸水平:、ddPCR、RT-qPCR、T7E1酶切; 蛋白:FACS、Western Blot、ELISA等 |
细胞活率及特定功能检测 细胞活率:台盼蓝染色法、CCK-8法、流式细胞检测; 包括表面标志性抗原:CD3、PC-1、CD34等 特定功能:T细胞杀伤功能、干细胞多能性检测 |
4.细胞系交付 |
多样的细胞交付形式 多克隆细胞群、单克隆细胞株; 提供细胞基因型复检、扩增及冻存服务 |
详实的交付报告 涉及的序列、实验记录、检测结果 |
一般工作流程:
基于CRISPR/Cas基因编辑体系:
Knock out/Knock in (敲除/敲入)、CRISPRi/a (沉默/激活)、Base Editor(碱基编辑)、Primer Editor(先导编辑)、表观遗传调控
可适用于不同细胞应用场景:
基于高效稳定的细胞转染系统和基因编辑系统,博腾生物成功在不同细胞系实现基因编辑,包括但不限于T细胞,TIL细胞,NK细胞,iPSCs和HSPCs等。
交付内容:
稳定细胞系: |
多克隆细胞群或单克隆细胞株;提供细胞基因型复检、扩增及冻存服务 |
交付报告: |
涉及的序列、实验记录、检测结果 |